用液氮罐冷凍細胞的原理:液氮冷凍技術(shù)是近代治療學(xué)領(lǐng)域中的一門(mén)新技術(shù)。冷凍治療是一種冷凍生物學(xué)的綜合效應。正常細胞在極度冷凍的狀態(tài)下,會(huì )發(fā)生不可逆轉的損害。
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于零下196~C液氮中低溫保存,可以使細胞暫時(shí)脫離生長(cháng)狀態(tài)而將其細胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再復蘇細胞用于實(shí)驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。
除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來(lái)購買(mǎi)、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時(shí)向培養基中加入保護劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。標準冷凍速度開(kāi)始為-1 到 -2℃/min,當溫度低于-25℃時(shí)可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
特別要注意的是:操作時(shí)應小心,以免液氮凍傷。液氮定期檢查,隨時(shí)補充,絕對不能揮發(fā)干凈,班德液氮罐30升一般液氮能用280天左右