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液氮罐短期儲存胚胎的可行性研究的討論
小鼠胚胎冷凍保存的成功，極大地推動(dòng)了低溫生物學(xué)的發(fā)展。胚胎冷凍保存現已成為實(shí)驗動(dòng)物保種的重要手段之一。實(shí)驗動(dòng)物胚胎庫較活體保種有著(zhù)經(jīng)濟又安全的優(yōu)勢。而通過(guò)胚胎引種因為快捷而廉價(jià)，使得國內外的胚胎運輸也變得日益廣泛。
氣相液氮運輸罐不同于傳統的也相液氮罐，凍存的胚胎不直接接觸液氮。它的罐壁內層有一層液氮層，液氮層吸附大量液氮，并向外排出液氮蒸汽來(lái)使罐內溫度達到一188℃至一194℃。胚胎不接觸液氮，能降低胚胎之間的交叉感染。同時(shí)操作時(shí)不會(huì )被液氮凍傷，增加了安全性。
本次實(shí)驗中采用C57BL／6、B6D2、DBA／2、B10A4個(gè)小鼠品系，是因為其中既有近交系、同類(lèi)系，也有雜交F1代。4個(gè)品系的冷凍胚胎在氣象液氮運輸罐存放14天的復蘇率與保存在氣相液氮罐的胚胎復蘇率均無(wú)差異；C57BL／6、B6D2、DB舭這3個(gè)品系的出生率也無(wú)差異。結果中B10A小鼠的出生率的差異顯著(zhù)可能時(shí)因為本次實(shí)驗的時(shí)間跨度較大。
從3月份一直持續到5月份，3月份放置氣相液氮運輸罐的室溫為ll℃，5月份為18℃。環(huán)境溫度可能會(huì )使氣相液氮罐內的液氮蒸汽消耗過(guò)快，罐體內溫度便會(huì )上升，而且環(huán)境溫度還會(huì )在胚胎的轉移過(guò)程中產(chǎn)生影響。
所以在盡量使放置氣相液氮運輸罐的環(huán)境保持比較低的溫度，本實(shí)驗胚胎在氣相液氮罐存放時(shí)間zui長(cháng)為14 d，因為本次實(shí)驗考慮到國際運輸所需時(shí)間較長(cháng)，所以胚胎每次存放時(shí)間都使用了氣相液氮運輸罐保存時(shí)間的上限。另外胚胎每次存放的數量較少，因此胚胎都在罐體的底部，是整個(gè)罐體溫度zui低的地方。
考慮到實(shí)際運用中的運輸時(shí)間會(huì )有長(cháng)短以及運輸胚胎時(shí)數量較多時(shí)，一根冷凍管夾可能會(huì )放上4個(gè)冷凍管，所以胚胎就不一定都位于罐體的底部。有關(guān)胚胎在氣相液氮運輸罐不同保存時(shí)間以及不同存放高度的保存結果，有待進(jìn)一步研究。
