氣相液氮運輸罐短期儲存胚胎的可行性研究

氣相液氮罐 短期儲存胚胎的可行性研究

【摘要】目的探討用氣相液氮運輸罐運輸小鼠胚胎和短時(shí)間保存小鼠胚胎的可行性。方法實(shí)驗使用4個(gè)小鼠品系（c57Bu6、B6D2、DBA／2、B10A），通過(guò)體外授精的方法得到2．細胞胚胎，用玻璃化冷凍法冷凍胚胎并儲存于液相液氮罐，然后轉移至氣相液氮運輸罐內放置14 d再轉入液相液氮罐，zui后進(jìn)行復蘇移植。

結果4個(gè)品系的冷凍胚胎的復蘇率分別為69．7％、77．27％、77．59％、72．64％，對照組的相應復蘇率為97％、84．38％、75％、71．43％，差異均不明顯（p<0．05）．4個(gè)品系胚胎移植后，除B10A這個(gè)品系的出生率差異顯著(zhù)外（尸0．05）。結論在氣相液氮運輸罐短時(shí)間內儲存胚胎或通過(guò)氣相液氮運輸罐進(jìn)行胚胎運輸是可行的。
[關(guān)鍵詞】小鼠胚胎；氣相液氮運輸罐；低溫保存

哺乳動(dòng)物的胚胎超低溫保存zui早在小鼠獲得成功，1972年英國學(xué)者Whittingham首先成功地冷凍保存了小鼠胚胎，發(fā)明了胚胎的慢速冷凍保存方、法【1】。1985年RaU等【z】成功保存小鼠8細胞胚胎。此后，研究人員主要從事低毒性的玻璃化溶液、簡(jiǎn)化冷凍程序和除去毒性抗凍劑等方面對玻璃化冷凍法加以改進(jìn)【}s1。

傳統的長(cháng)期活體保種，不但需要大量空間、人力、物力，還可能發(fā)生遺傳漂變和遺傳污染【61。許多實(shí)驗室都通過(guò)冷凍保存小鼠胚胎的方法建立冷凍胚胎庫，因此引進(jìn)新的小鼠品系越來(lái)越多地通過(guò)引進(jìn)小鼠胚胎的形式進(jìn)行。

但傳統的液相液氮罐在運輸時(shí)有不少缺點(diǎn)，罐體體積大、分量重，溢出液氮容易凍傷人等。而新型的氣相液氮運輸罐是靠罐壁內層的液氮層吸附大量液氮，并向外排出液氮蒸汽來(lái)使罐內溫度達到一188℃至一194℃保存胚胎。它有著(zhù)體積小分量輕的優(yōu)點(diǎn)，方便運輸，還可以降低胚胎之間交義污染。

本文通過(guò)小鼠冷凍2一細胞胚胎在氣相液氮運輸罐保存14 d后，進(jìn)行復蘇和移植，并和保存在傳統液相液氮罐胚胎的復蘇率和出生率相比較，來(lái)探討用氣相液氮運輸罐運輸或短期保存小鼠胚胎的可行性。